Invitrogen™ SuperScript? III First-Strand合成系统
2023-05-09
产品详情
- 价格:7190
- 产品名称Invitrogen™ SuperScript? III First-Strand合成系统
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- 简介
用于 RT-PCR 的 SuperScript™ III 第一链合成系统经过优化,以从纯化 poly(A)+ 或总 RNA 合成第一链 cDNA。使用该系统可检测 100 bp 至 >12 kb 的 RNA 靶标。起始材料量的范围为 1 pg – 5 μg 总 RNA。SuperScript™ III 逆转录酶是一款 M-MLV 逆转录酶,其经过基因改造以降低 RNase H 活性和提高热稳定性。该酶可用于在 42–55°C 温度范围内合成 cDNA,相对于其他逆转录酶,具有更高的特异性和 cDNA 得率以及更多的全长产物。因为 SuperScript™ III RT 不会受到核糖体和转运 RNA 的显著抑制,所以其可用于从总 RNA 制备物合成第一链 cDNA 的过程。
使用 SuperScript™ III 第一链系统
在第一步中,使用总 RNA 或 poly(A)+ 选定 RNA(由 oligo(dT)、随机引物或基因特异性引物引发)合成 cDNA 。在第二步中,在另一根管中使用目标基因特异性引物进行 PCR。对于 PCR 反应,我们推荐使用以下 DNA 聚合酶之一:Platinum™Taq DNA 聚合酶可提供自动热启动条件,使特异性提高至 4 kb,Platinum™Taq 高保真 DNA 聚合酶可为高达 15 kb 的靶标提供更高的得率和高保真度,而 Platinum™Pfx DNA 聚合酶可为高达 12 kb 的靶标提供极大保真度。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
GC-Rich PCR Performance
高
适用于(应用)
Microarray Analysis
内容与储存
用于 RT-PCR 的 SuperScript™ III 第一链合成系统提供以下成分:
?Oligo(dT)20 (50 μM),50 μl
? 随机六聚体 (50 ng/μl),250 μl
? 10X RT 缓冲液,1 mL
? 0.1 M DTT,250 μl
? 25 mM 氯化镁,500 μl
? 10 mM dNTP 混合物,250 μl
? SuperScript III RT (200 U/μl),50 μl
? RNaseOUT (40 U/μl),100 μl
?大肠杆菌 RNase H (2 U/μl),50 μl
? DEPC 处理水,1.2 mL
?总 HeLa RNA (10 ng/μl),20 μl
? 正义链对照引物 (10 μM),25 μl
? 反义链对照引物 (10 μM),25 μl
足以用于50次反应(基于 20 μl 的反应规模)。储存在 -20°C 下。
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