SuperScript™ IV First-Strand Synthesis System
2023-05-09
产品详情
- 价格:8017
- 产品名称SuperScript™ IV First-Strand Synthesis System
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- 简介
适用于 RT-PCR 的 SuperScript™ IV 第一链合成系统经过优化,以从纯化 poly(A)+ 或总 RNA 中合成第一链 cDNA。试剂盒包括 SuperScript™ IV 逆转录酶 (RT),这是一种专有 MMLV 突变体,可在 RT 反应中产生稳健可靠的 cDNA 合成。SuperScript™ IV 合成系统相比基于 SuperScript™ III 的系统在抑制剂耐受性、合成性和反应速度等方面得到了很大提高,同时保留了前代系统的所有优点,包括较高的热稳定性、高效全长 cDNA 合成以及较低的 RNase 活性。在多种样品中存在可导致其他当前可用 RT 效率低下的抑制剂的情况下,SuperScript™ IV 系统仍能提供可靠、一致和快速的 cDNA 合成。
SuperScript™ IV 第一链合成系统包含 RT 反应所需的所有组分,以及一种其它对照基因和相关引物,同时为您提供定制 RT 设置的灵活性,以满足您的应用需求。SuperScript™ IV 合成系统是实现 RT-PCR 应用高性能和灵活性的首选。我们推荐将其用于所有 RT-PCR 应用,尤其是当重现性和可靠性成为主要考虑事项,以及 RNA 样品中的抑制剂可能干扰 cDNA 合成,进而导致基因表达研究出现偏倚时,我们推荐使用这款产品。
SuperScript™ IV 第一链合成系统的特性包括:
?显著提高了对各种可能干扰 cDNA 合成的抑制剂的耐受性
? 能在各类样品中进行可靠、特异的 cDNA 合成
? 逆转录酶反应更快,将孵育时间从 >50 min 缩短至 10 min
? 持续合成能力明显优于 SuperScript™ III RT
酶来源
从表达 M-MLV pol 基因的大肠杆菌中提纯制成,并经过改良提高了热稳定性和半衰期、合成性、抑制剂耐受性,降低了 RNase H 活性。
性能和质量检测
脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶及核糖核酸酶分析;cDNA 产物的得率和长度。
单位定义
一个单位的 SuperScript™ IV RT 是指在 37°C 下使用多聚腺苷酸 (A) 寡核苷酸 (dT)12-18 作为模板/引物,将 1 nmole 脱氧核糖核酸在10分钟内掺入酸可沉淀材料所需要的酶量。
单位反应条件
50 mM Tris-HCl(pH 值 8.3)、4 mM MgCl2、10 mM DTT、50 mM KCl、0.5 mM dTTP、0.4 MBq/mL [3H]-dTTP、0.4 mM 多聚腺苷酸 (A) 寡核苷酸 (dT)12-18 和酶,20 μL,37°C 下 10分钟。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
GC-Rich PCR Performance
高
适用于(应用)
RT-PCR, Real Time PCR (qPCR)
内容与储存
Oligo(dT)20 (50 μM)、50 μL
随机六聚体 (50 ng/μL)、250 μL
5X RT 缓冲液、1 mL
0.1 M DTT、250 μL
10 mM dNTP 混合物、250 μL
SuperScript™ IV RT(总计10,000个单位,浓度为 200 U/μl)、50 μL
核糖核酸酶抑制剂 (40 U/μL)、100 μL
大肠杆菌 RNase H (2 U/μL)、50 μL
DEPC 处理水、1.2 mL
总 HeLa RNA (10 ng/μL)、20 μL
正义链对照引物 (10 μM)、25 μL
反义链对照引物 (10 μM)、25 μL
在 -5 至 -30°C 下储存所有成分。
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