产品展厅
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产品信息
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
| wb30520-1KU | TEV Protease重组烟草蚀纹病毒蛋白酶 | 1KU | 1000 |
| wb30520-5KU | TEV Protease重组烟草蚀纹病毒蛋白酶 | 5KU | 4599 |
产品描述
重组型 TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更好的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30°C时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30°C的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His标签，通过Ni-NTA（P7151）树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。
产品性质
| 来源（Source） | 大肠杆菌 |
| 外观（Appearance） | 无色透明液体 |
| 比活力（Specific Activity） | 10 U/μl |
| 活性定义（Unit Definition） | 在1×rTEV Buffer（50 mM Tris，pH8.0，0.5 mM EDTA，1mM DTT）中，30℃反应1h，剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。 |
| 纯化（Purification ） | Ni亲和纯化 |
| 纯度（Purity） | ≥95%（by SDS-PAGE） |
产品组分
| TEV Protease储存液 | 10X Cleavage Buffer |
| 25 mM Tris-HCl，pH 8.0 | 10 mM DTT |
| 150 mM NaCl | 500 mM Tris-HCl，pH 8.0 |
| 50 mM DTT | 50 mM DTT |
| 1Mm EDTA |
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| 50%（V / V）Glycerin |
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运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。
1. 在EP管中配制如下反应体系，
| 融合蛋白 | 50 μg |
| rTEV Protease | 2μl(10U/μl) |
| rTEV buffer （10×） | 10μl |
| ddH2O（超纯水） | up to 150 μl |
2.反应时间参考表
| 反应体系 | 不同温度下参考反应时间 | ||
| 4°C | 20°C | 30°C | |
| 反应时间 | 15-16h | 6h | 2h |
待测融合蛋白100μg，加入TEV Protease 2μl，4℃反应16小时，取酶切前后样品SDS-PAGE检测，如右图所示 >90% 融合蛋白被切割。
TEV Protease活性测试
长期储存于 -80℃，可保存2年；或小量分装后保存于 -20℃，可保存6个月，避免反复冻融。10X rTEV buffer （10×）Buffer置于 -20℃保存。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
