产品信息：

产品简介

双丙氨膦（Bialaphos，也称为Bilanafos）是由几种土壤链霉菌代谢产生的一种天然有机磷三肽抗生素，结构上由两个L-丙氨酸残基和一个谷氨酸类似物草丁膦（phosphinothricin，PPT；也称为glufosinate）组成。一旦进入正常细胞（不含抗性基因），其内的肽酶水解双丙氨膦，释放草丁膦化合物，从而抑制正常氮代谢和导致胞内氨累积，破坏谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）相关的各种代谢活动， 终杀死细胞。双丙氨膦不仅是一种广谱除草剂，还能 抑制革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、和一些真菌类植物 病原菌生长。

产品应用：
植物基因工程研究（筛选标志）作用机理：双丙氨膦可用在许多植物物种（包括小麦，大麦，黑麦，燕麦，水稻和玉米）的转化实验，用来筛选含bar基因（from Streptomyces hygroscopicus）或pat基因（from Streptomyces viridochromeogenes）的转基因工程细胞系，这两种基因都能编码草丁膦N-乙酰转移酶（phosphinothricin N-acetyltransferase），使其转化成为一种无GS抑制活性的化合物，从而使得细胞对双丙氨膦和草丁膦产生抗性。转基因玉米研究，双丙氨膦比草铵膦的活性更强；转基因小麦研究，双丙氨膦是 可靠的选择标准；酵母基因工程中，双丙氨膦逐渐成为重要的选择标准。

应用案例【转基因的小麦幼胚/愈伤组织筛选】（仅作参考）：

1）使用草铵膦（PPT）或双丙氨膦进行转化细胞的筛选；

2）粒子轰击（bombardment）后将未成熟幼胚逐个转移到E3培养基，维持培养7-14天；

3）胚胎转移到含5μg/ml PPT（或双丙氨膦）的MSCB5培养基（*轮筛选用培养基），黑暗培养2周；于这2周内不能正常生长的愈伤组织直接扔弃。

4）用解剖刀将在MSCB5培养基上增殖的细胞簇解离，亚克隆，转移到含有10 μg/ml PPT（或双丙氨膦）的MSCB10培养基，维持培养4周。

5）在含5μg/ml或10μg/ml PPT（或双丙氨膦）的培养基上筛选过程的持续周期约为50-75天。将所有培养物放到植物生长培养箱内，设置25 °C，黑暗培养。每一个转基因愈伤组织在含有筛选标志的培养基上 终生长为大量的胚性愈伤组织。

6）设置1-10μg/ml PPT（或双丙氨膦）的梯度浓度来测试未转化愈伤组织，以建立更加有效的筛选系统。每一次实验大概准备20个目标培养平板。2个为对照，1个在N6C1上生长以监测培养物的健康情况，另1个在含5-10μg/ml双丙氨膦的N6C1上生长以验证未转化细胞对选择标志的反应。

【注意】：转基因小麦愈伤组织的选择实验中双丙氨膦是有效的筛选标志，然而双丙氨膦不能杀死未转化细胞。为了得到理想的筛选效果，建议低密度（大概每个平板上10个未成熟幼胚）亚培养粒子轰击后的细胞。

运输和保存方法

-20℃长期保存，冰袋运输。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品：